如果在RT荧光PCR中,用一步法RNA直接转成DNA不行,结果用cDNA二步法转成DNA却可以

SXTY123 1年前 已收到3个回答 举报

蔴紫菜 幼苗

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有可能,一步法的试剂里面,可能污染了,不小心引入了RNase,或者试剂失效.
你可以使用cDNA为模板,用一步法的试剂,上机试试,看看会不会有效果.如果还是没有效果,就说明试剂有问题了,那个试剂不要反复冻融.

1年前

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绿色海洋520 幼苗

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当然不行了,先在用的聚合酶都以DNA为模板合成互补的DNA链的,按你的想法第一轮是以RNA为模板扩增,以后的模板里又有RNA又有DNA,现有的聚合酶没那么厉害吧,什么都能当模板是这样 一直用RNA做不好 这一次原本用RNA做成DNA 结果失误加了之前转好的cDNA 但最终一步法结果还是 不错的 所以有点搞不懂...

1年前

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烟雨红尘2006 幼苗

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问的是为什么吗?

1年前

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