如何提细胞的组蛋白做western blot?

你的意思就是提取核蛋白,提取核蛋白和提取全蛋白用的裂解液是不一样的.一般情况下我们都是买试剂盒,里面包含有细胞裂解液和核裂解液,按照说明书实用就行了.
1 20mmol/L的Hepe（PH 7.9）
2 420mmol/L NaCl
3 1.5mmol/L MgCl2
4 2%Igepal
5 0.5mmo/L EDTA
6 20%甘油
7 1mmol/L DTT
8 0.25mmol/L PMSF
9 5ug/ml Aprotinin
10 5ug/ml Pepstatin
11 5ug/ml Leupeptin
或者你可以按照这个配,这个是细胞核裂解液.
做法就是,你按顺序提了全蛋白以后把上清弃掉,在沉淀中加入这个核裂解液,震荡然后离心,此时上清就是核蛋白了.

差速离心先分离出细胞核，然后可以抽总核蛋白做WB。钱多的话有专门的试剂盒提组蛋白的。

干嘛非要提组蛋白呢？直接提取细胞总蛋白，然后用组蛋白的抗体检测就是了，裂解液就用一般的就是了

通过有机溶剂或水溶法制备总蛋白
水溶液提取法
针对水、稀盐、稀酸或碱溶液中的蛋白质。稀盐和缓冲系统的水溶液
对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂 。
细胞裂解液： 50 mmol/L Tris-HCl, 150 mmol/L Nacl ,5 mmol/L EDTA, 1%NP40 ， 0.05% PMSF ， 2μg/mL ...