做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?

做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?
用marker标记 western blot转膜时 电流330mA,转膜1小时后 膜上没有marker的条带请问这是为什么呢?
情系蓝黑 1年前 已收到4个回答 举报
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风思颖 幼苗

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只看marker也不可靠吧?还是用ponseau S （丽春红）给膜上的蛋白质显色看一下到底如何.
另外膜上没有marker的话,胶上还看得到marker吗?如果还在胶上,那么蛋白质可能也还在胶上,可以改变电流和时间重做一遍.
如果胶上膜上都没有,那搞不好就跟二楼说的一样,正负极接反,样品全跑到缓冲液里去了.

1年前

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ii祸害 幼苗

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没接电或者正负极接反了～～然后就是转移盒的正反面弄翻了～～自己看着办吧～～

1年前

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jingzhe1646 幼苗

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正负电极搞错了吧？

1年前

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坏坏二公子 幼苗

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首先确定电流正负极没有接反。然后对胶和膜都进行染色，看看是不是有蛋白。同时查看滤纸上是不是有印。降低电流和/或时间再看看。

1年前

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