从自然界中筛选高温淀粉酶产生菌的实验方案

从自然界中筛选高温淀粉酶产生菌的实验方案
要说明主要步骤及其基本原理.这是一道考研题,
htsr 1年前 已收到1个回答 举报

neverhanyihe 幼苗

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我研究生做过低温蛋白酶产生菌的筛选,很像么.
首先,请去筛选高温菌,可以选择附近环境长期处于高温状态的锅炉、暖房等地方的土壤,有腐殖质的地方最好,取一点土回来.
将土样泡热水,搅匀,轻微沉淀后取上清
将上清3000g离心5分钟,菌就沉底了,倒掉上清,加入少量无菌水,打匀,你就获得了浓缩的菌液
配置培养基,可以选择EMB等高营养全培养基,将获得的菌液梯度划线于平板上
至于高温下培养48小时,长出的菌落为高温菌,尽量多的挑取单菌落,标记代号,摇瓶培养,获得的菌液进行破胞,8000g离心10分钟,细胞残渣沉底,上清中含有淀粉酶(如果这种菌能产生淀粉酶的话)
琼脂、淀粉、水高温灭菌,倒平板,用牛顿杯立于上面,滴入上一步离心获得的上清,高温处理数小时连续观察,淀粉被分解,凝胶变清澈的就是能产生淀粉酶的菌液.

1年前

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