若以N 表示扩增循环数,当一条双链模板循环扩增30次时,反应体系中总分子数多少?非目的产物多少?目的产物多少?

钱江江 1年前 已收到1个回答 举报

jxw_9911 春芽

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这取决于你的模板和引物的关系,以及扩增效率.
如果引物是从模板的两端开始,也就是扩出的产物和模板一样,那么总的拷贝数为A*(1+Y)^N(其中A为初始拷贝数,Y为扩增效率,N为扩增循环数)
如果是从大的双链DNA模板中扩增一个小片段,期望的目的产物首先在第2个循环后第3个循环时出现,然后扩增产物呈指数增长,同时非特异扩增产物是线性扩增的,需要注意的是非特异产物在下轮会产生一个特异产物.为方便理解我先假设扩增效率Y=1,初始拷贝数A=1,做一下推导.注:以双链算一个分子.
第1轮后:目的产物:0,非目的产物:1
第2轮后:目的产物:0+1,非目的产物:2
第3轮后:目的产物:2+2,非目的产物:3
第4轮后:目的产物:8+3,非目的产物:4
.
第N轮 后:目的产物:(2^N)-N-1,非目的产物:N
(+号前面是目的产物扩增,加号后为非目的产物扩增)
所以体系中总分子数为:(2^N)-N-1 + N +1(模板)=2^N
非目的产物为:N
目的产物为:(2^N)-N-1
如果考虑A和Y的话,就将上面的数字乘A,2用1+Y代替.

1年前

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