萌发的小麦种子中主要有α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活,但耐热)和β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15min后就失活
萌发的小麦种子中主要有α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活,但耐热)和β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15min后就失活).
实验材料:萌发3天的小麦种子
主要器材:麦芽糖标准溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等
实验目的:测定40℃条件下α-淀粉酶的催化效率
实验步骤:
步骤一:制备不同浓度麦芽糖溶液与斐林试剂生成的标准颜色.取7支洁净试管编号,按表中所示加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热3min,取出后按编号排好.
试剂 | 试管 |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
麦芽糖标准溶液(mL) | 0 | 0.2 | 0.6 | 1.0 | 1.4 | 1.6 | 2.0 |
蒸馏水(mL) | X | 1.8 | Y | 1.0 | Z | 0.4 | 0 |
斐林试剂(mL) | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
表中Y代表的数值是______.
步骤二:制取α-淀粉酶溶液
①用______制备淀粉酶溶液.
②将装有淀粉酶溶液的试管置于______,取出后迅速冷却以获得α-淀粉酶溶液.
步骤三:取A、B、C、D四只试管并分别作以下处理.
试管 | A1 | A2 | A3 | B1 | B2 | B3 | C | D |
5%淀粉溶液(mL) | 2 | 2 | 2 | | | | | |
α-淀粉酶溶液(mL) | | | | 2 | 2 | 2 | | 2 |
蒸馏水(mL) | | | | | | | 2 | |
40℃水浴锅中保温(min) | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
步骤四:将A
1和B
1试管中溶液加入到E1试管中,A
2和B
2溶液加入到E2试管,A
3和B
3溶液加入到E3试管,C、D试管中的溶液均加入到F试管中,立即将E
1、E
2、E
3、F试管在40℃水浴锅中保温一段时间.然后分别加入______,并经过______后,观察颜色变化.
结果分析:将E
1、E
2、E
3试管中的颜色与______进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出a-淀粉酶的催化效率的平均值.
讨论:
(1)实验中F试管所起的具体作用是排除______对实验结果的干扰从而对结果进行校对.
(2)若要测定β-淀粉酶的活性,则需要对步骤______进行改变,具体的操作是将______一段时间从而获得β-淀粉酶.