限制酶 | Ala I | EcoRI | PstI | SmaI |
切割位点 |
飞也789 幼苗
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(1)①表示采用逆转录法人工合成目的基因(耐盐碱基因),而人工合成的目的基因不含启动子和终止子;切割运载体时采用的是限制酶EcoRⅠ、SmaⅠ,为了便于目的基因与运载体定向连接形成重组DNA,还应在基因两侧的A和B位置接上限制酶EcoRⅠ、SmaⅠ的识别序列.
(2)目的基因扩增4代后共得到16个DNA分子,除了含有模板DNA链的1个DNA分子外,其余的DNA分子都含有引物I,因此共用了引物Ⅰ15个.
(3)限制酶PstⅠ的识别和切割序列为,因此用该酶切割DNA形成黏性末端的过程为:.
(4)图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌,而是先将其导入大肠杆菌,目的是获取大量重组质粒(让目的基因扩增).
(5)将目的导入微生物细胞时,需要用Ca2+处理微生物细胞,使其成为易于吸收周围环境中DNA的感受态.因此步骤⑤⑥过程中都需用Ca2+处理两类细菌.从分子水平检测目的基因是否表达,采用抗原-抗体杂交法.
(6)假设该抗盐碱基因D,通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上,则该水稻的基因型可表示为Dd,在减数第一次分裂间期细胞中进行了DNA复制,因此联会时细胞中有2个D基因.
故答案为:
(1)启动子和终止子 EcoRⅠ、SmaⅠ
(2)15
(3)
(4)获取大量重组质粒(让目的基因扩增)
(5)Ca2+ 抗原-抗体杂交
(6)2
点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题结合耐盐碱水稻新品系的培育过程图解,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤,能准确判断图中各过程的含义,再结合图中信息准确答题.
1年前
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你能帮帮他们吗