cDNA连到表达载体上也可以将表达载体转化农杆菌进行复制和保存啊

我和WW有个约会 1年前 已收到2个回答 举报

hunancsdl 春芽

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没怎么看明白你的问题,就我所知cDNA是可以连接到表达载体上的,而是不是表达载体要在农杆菌上进行保存和复制我不是很清楚.我了解到一半的实验室都是了转化到大肠杆菌上进行复制和保存的,如果你的基因是要导入植物中的话可能是需要用脓杆菌的,没有特殊情况的话还是不用的吧.

1年前 追问

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我和WW有个约会 举报

cDNA一般连到克隆载体上再转化大肠杆菌进行保存复制,需要转化植物时再从克隆载体上切下连到表达载体上转入农杆菌,我想知道的是为什么大家都要采用上述程序而为什么不直接将cDNA连到表达载体上转入农杆菌去转化植物呢

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就我看来之所将cDNA先连接到大肠杆菌上是为了能够保存、扩增这段cDNA,不至于你在将它导入表达载体上再转入农杆菌再导入植物中之后把它用完了,以后你还要用的话就又要去提取,很麻烦的。放在大肠杆菌上方便保存,而且不会丢失这段cDNA。另外,是不是因为农杆菌不方便保存之类的,对于农杆菌我不是很了解。

hvmaa 幼苗

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要先放到大肠杆菌,拷贝数高,你的cDNA才多,才能转到农杆菌里面。其实正常情况,大肠和农杆菌都要保存的。尽管放在超低温,质粒还是会丢失的。而且你的农杆菌在使用中污染了,还可以通过大肠重新转化新的农杆菌。

1年前

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