以齐墩果酸为标准品进行显色反应,紫外分光测OD值绘制标准曲线,结果测得的值总是偏低,什么原因呢?
以齐墩果酸为标准品进行显色反应,紫外分光测OD值绘制标准曲线,结果测得的值总是偏低,什么原因呢?
称取0.0097g齐墩果酸无水乙醇溶解并定容至50ml制得浓度为0.194mg/ml标液,分别吸取标液0.00 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70ml于具塞试管中,80度水浴挥干溶剂,加入新配制5%香草醛冰乙酸溶液0.20ml,高氯酸1.2ml后70摄氏度水浴加热15min,流水冷却至室温后加入乙酸乙酯3.6ml,震荡后静置15min,550nm下测吸光度.
以上是所有的操作过程,自己测得的总是比文献所得的要小很多,比如0.7ml
的文献是0.947,自己测得的只有0.268.自己所得数据线性很好,
样品是之前剩下的不过一直放在干燥器里的.
移取标液应该是比较准确的,就算不准确也不会差这么多;
水浴锅其他同学都在用的,
香草醛冰乙酸溶液现配的,
高氯酸是新领的试剂,
以上三点应该不会有什么问题.
70摄氏度水浴时间控制还是比较好的,相差不会有几秒.
乙酸乙酯也是新领的试剂没有问题.
紫外分光光度计大家都在用的,应该没有不准吧.、
自己实在找不出问题出在哪里,