16sRNA的一些问题16sRNA的通用引物好像有很多不同的序列段,不知道该如何选择,而且我还想知道,为什么16sRNA

16sRNA的一些问题
16sRNA的通用引物好像有很多不同的序列段,不知道该如何选择,而且我还想知道,为什么16sRNA测序之前必须要用载体转化,为什么不能PCR跑胶之后回收,然后直接测序呢?
xujx944 1年前 已收到1个回答 举报
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豆茜茜 幼苗

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PCR产物直接测序是用PCR引物进行测序,
而测序两端引物结合位点会有几十个碱基读不出来.
这个是目前技术问题,所有公司的测序仪器都读不出来.
而TA克隆之后就是用载体的通用引物测序,
因为载体的序列是知道的,
所以即使两端有一部分读不清
也没有关系,
这样两个反应就可以测通拼接得到全长序列了.

1年前

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