跪求高手指点一下,为什么我的PCR产物电泳图这个样子.引物是通用引物27F和1492r体系25ul,buffer：2.5

跪求高手指点一下,为什么我的PCR产物电泳图这个样子.引物是通用引物27F和1492r

体系25ul,buffer：2.5,dntp：2,引物：0.5,模板0.5,taq酶天根的（5U）0.2ul

预变性94℃,4min

变性94℃,40s

退火56℃,1min

延伸72℃,1.5min

三十个循环

之后72℃,10min

nick2005 1年前 已收到3个回答 举报
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未激活628 幼苗

共回答了19个问题采纳率：84.2% 举报

拖带啊
知道被合成基因的GC值吗?目的基因大小多少?
这些都和PCR程序设计有很大的关系的 如果你不知道 只能进行梯度实验
目测你的引物没有问题 因为已经出来了
dNTP少一点 引物多一点

1年前

8

健康向上223 幼苗

共回答了18个问题 举报

你这退火时间也太长了吧！一分钟！15秒就够，延伸时间也不需要1.5min，40-50秒足够，试试看！

1年前

1

tsuisang 幼苗

共回答了119个问题 举报

你给的这些数据都没什么用。
你这个不是pcr 的问题，也不是引物的问题。（那个出来的是目的条带吧？）
你所用的模板是什么？质粒还是基因组？模板浓度是多少？（可能是模板浓度太高）

1年前

1
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你能帮帮他们吗

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