cjtx
幼苗
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按照你的意思,插入序列是抗卡那霉素的基因,不知道我的理解是否正确.插入的序列应该表达量很小,所以不能作为筛选的标准,你的T载体原本是带什么抗性的?通常是Amp的,建议你用Amp来筛选
1年前
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bestdxh365
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但是如果用T-vector上面的Amp抗性筛选的话,岂不是会有很多假阳性?之所以用插入序列上的Kana抗性来筛选,就是为了避免假阳性。结果有了转化子,却扩增不出应有大小的条带.....不知道是为什么......
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cjtx
你插入的序列没用凝胶回收试剂盒纯化一下吗?纯化过的片段再连接90%是真阳性,我认为i卡那霉素抗性基因是没法表达的,离启动子太远了