探索温度对酶活性影响的实验，需要进行如下步骤：

要探索温度对酶活性影响，就要以温度为变量设置对照实验，即设计的实验应该是除温度不同外，其它条件都要相同；其次，还要注意实验步骤的设置：试管编号→加入等量淀粉糊→加入等量淀粉酶→不同温度下水浴相同时间→滴加碘液→观察现象、得出结论．因此最合理的实验顺序应为①取3支试管，编号并注入2mL淀粉溶液→②向各试管注入1mL新鲜淀粉酶溶液→④将3支试管分别放入60℃的热水、沸水和冰块中维持5min→③向3支试管中各滴一滴碘液→⑤观察实验现象．
故选：D