已知两个蛋白有相互作用,用其中一个蛋白的抗体做免疫共沉淀,SDS-PAGE胶电泳后出现几条带?

出现两条带为什么免疫共沉淀结果跑出的带比直接跑western的带要粗?

是不是因为跑出的带粗才说明这两个蛋白（ANO1和IP3R1）之间有相互作用?

burninglake 1年前已收到1个回答举报

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co-ip跑出来的两个蛋白,如果大小不一样,肯定是两条带的,跑WB前会让蛋白质变性,他们之间的结合不存在了
跑出来粗是因为co-ip相当于一个纯化的过程,没有co-ip的样是检测一大堆蛋白里面你需要的蛋白的量,而co-ip是就这两个纯化的蛋白的样,一般都会粗很多的.

1年前追问

burninglake 举报

谢谢你可是免疫共沉淀组与对照组中的蛋白（ANO1和IP3R1）量是相等的跑出来的条带应该是一样粗啊

举报嫩冰

蛋白上样量一样的话，lysate里面是所有的细胞蛋白混合物，ANO1和P3R1只占很少很少的一部分，而co-ip里面主要是ANO1和P3R1，两个样本里面的目的蛋白完全是两个等级的啊

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