实验:比浊法测定发酵液中大肠杆菌的浓度 样品为什么要稀释?吸光度值为什么要控制在0.2-0.7之间?

老舅330 1年前 已收到2个回答 举报

wgjwlj 幼苗

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稀释其实就是为了控制吸光度在一个合适的范围内
控制吸光度的目的有点不好描述,我先简单地说下,你不明白再问我:
原理是不同浓度的菌液有不同浓度的吸光度,通过对一系列浓度菌液吸光度的测量,通过浓度和吸光度的比值,我们就可以划一条直线,X轴为浓度,Y轴为吸光度.当一个未知样本的吸光度知道了,也就是X轴上的那个点知道了,那么通过这条直线,它所对应在Y轴上的浓度就是我们的测量结果了.
第一方面:
测量的关键就是要保证线性,也就是说要保证浓度和吸光度的比例关系,这只能在较低浓度可以保证,因为浓度高了,会使吸光度无限接近100%,那显然就不在这条直线上了,曲线就会下压,那么就无法计算了.所以样品的浓度一定要在线性范围内.这就是为什么最大是0.7
第二方面:
如果你稀释的浓度太低了,夸张一点说,比如只有0.01,出现一点点污染,使得数值变成0.02,实际上在正常情况下这一点点误差完全可以忽略的,可是因为你稀释太低了,一下子造成了测量结果是实际值的2倍!这就太夸张了.这就是为什么最小值是0.2
当然,这两个数是实际工作中总结出来的

1年前

7

小晶Juncy 幼苗

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稀释是因为要比色,颜色过深测得的结果误差肯定很大~~~

1年前

2
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