(2011•闸北区模拟)目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒,pBR322质

(2011•闸北区模拟)目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒,pBR322质粒是较早构建的质粒载体,其主要结构下如图乙的一所示.

(1)构建人工质粒时要有抗性基因,以便于______.
(2)pBR322分子中有单个EcoRI限制酶作用位点,EcoR 1只能识别序列一GAATTC一,并只能在G与A之间切割.若在某目的基因的两侧各有1个EcoRI的切点,请画出目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端______.
(3)为了检测上述重组质粒中是否导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌,将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图二的菌落.再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置).与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是______,图三结果显示,多数大肠杆菌导入的是______.
捣捣捣米 1年前 已收到1个回答 举报

chenjia_930724 花朵

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解题思路:本题考查了标记基因的生理功能是便于鉴定受体细胞中是否导入目的基因.菌落能在含有氨苄青霉素的培养基生存,说明了菌落含有抗氨苄青霉素基因;将沾上菌落绒布按到含四环素的培养基上培养,仍能生长,说明了菌落也含有抗四环素基因.

(1)质粒上的抗性基因可作标记基因,便于鉴定受体细胞中是否导入目的基因.
(2)在目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点,即目的基因两侧有-GAATTC-,目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端为
(3)DNA连接酶能连接磷酸二酯键.经BamHⅠ处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因能连接起来,说明这两种酶切割获得的黏性末端相同.
(4)图二中的菌落能抗氨苄青霉素,将灭菌绒布按到图二中培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到图三含四环素的培养基上培养,仍能生长的也能抗四环素,空圈为不能抗四环素的(只能抗氨苄青霉素).图三结果显示,多数大肠杆菌既能抗氨苄青霉素,又能抗四环素,说明导入的是pBR322质粒,而不是重组质粒(重组质粒的四环素抗性基因被切断,不能表达,因此含重组质粒的大肠杆菌抗氨苄青霉素).
故答案为:
(1)筛选(鉴别目的基因是否导入受体细胞)
(2)
(3)能抗氨苄青霉素,但不能抗四环素 既能抗氨苄青霉素,又能抗四环素的pBR322质粒

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查了基因工程的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力,及能会鉴别、选择试题给出的图表生物学信息,并能运用这些信息,结合所学知识解决相关的生物学问题.

1年前

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