质粒DNA酶切不完全是什么现象

忆梦轩 1年前 已收到2个回答 举报

anan-lan 幼苗

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什么切不完全,说清楚一点

1年前 追问

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忆梦轩 举报

酶切不完全。即酶切不完全的结果及原理!

举报 anan-lan

原理就是酶(蛋白质)具有特定的碱基序列,会与其相应的特定的碱基序列结合,发生水解,切断质粒。

真诚善良京男 幼苗

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楼主你好,我的回答是建立在双酶切的基础上的。
现象的话你通过跑一个琼脂糖凝胶电泳就能看出来,空载质粒完全切割的话应该只有一条带,没切开的话会有2-3条带,而且位置比较高。 如果是连入了目的片段的载体,那么完全切割只有两条带。未完全切割的话会有3-4条带左右。
产生原因很多:
1.可能是酶切的时间不够。
2.可能是你用双酶切的时候buffer的体系两种酶不能发挥最大功...

1年前

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