自己设计了一个实验是从土壤中分离及筛选产纤维素酶菌,结果培养了36小时平板上一个菌也没长出来为什么啊

自己设计了一个实验是从土壤中分离及筛选产纤维素酶菌,结果培养了36小时平板上一个菌也没长出来为什么啊
实验器材及药品：
选择培养基：KH2PO4 0.5g,MgSO4 0.5g,(NH4)2SO4 5g,CMC-Na 2g,琼脂20g,
刚果红（10mg/ml配制灭菌后按1ml CR/200ml培养基加入）,PH=自然
定容1000ml.
高压灭菌锅,摇床,恒温培养箱,500ml三角瓶,培养皿,移液枪及枪头,试管及试管架,酒精灯等.
1、在底物富集的地方（土下10cm）采土样20g于三角瓶中加水后放入摇床中摇40min.
2、将培养基及刚果红（CR）溶液配制好后和枪头,培养皿、各装有10ml水的试管放入灭菌锅中121℃下灭菌 20min.
3、将CR溶液倒入培养基中后再倒平板.
4、用移液枪将土样吸取0.2ml菌悬液到无菌水中,一次梯度稀释到10-1 —10-7 .
5、涂布10-4—10-7的菌悬液后37℃下培养24h.
.
.
.
.
因为一些原因导致 氮源用硫酸铵,是否需要用有机氮混合搭配?
PH搞忘调了,悲剧啊 原本想的是7 可0.几的盐能改变PH吗
刚果红溶液是培养前加入的 是否是待菌长出来后再加啊?
培养温度正确吗?