做流式分选Treg细胞,将CD4和CD25用一种颜色荧光染料FITC标记行吗

丁香罗兰 1年前 已收到2个回答 举报

doubao87 幼苗

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当然不行.如果你用的流式有2个以上激光,最好一个用FITC(激发光波长488nm),另一个用非488激发的,这样做代偿的时候干扰小.

1年前 追问

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丁香罗兰 举报

我是不是可以先用抗CD4得到CD4+细胞,然后再用抗CD25,去掉CD25+的细胞,这样得到CD25-D的细胞。

举报 doubao87

最好不要。你是不是由于一抗都是来源于小鼠,所以只有一种2抗?建议把一抗的一种换为其他物种(比如兔子)的。 要是按照你的方法,都用FITC。那么CD4+的细胞是阳性的(绿色),然后你又要去掉CD25+(又是绿色)。就无法区分了。

GEWGGEHEW 幼苗

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确实不行,你要的应该是CD4+CD25+的细胞,如果都用FITC标记,那么CD4+CD25-的细胞也被选上了,同一个标记走的是同一个通道。

1年前

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