双酶切鉴定（或者测序）是否含有目的基因的时候,为何用pMD18-T载体?
双酶切鉴定（或者测序）是否含有目的基因的时候,为何用pMD18-T载体?
过程主要是：
从小麦胚胚芽鞘中提出总的RNA,反转录cDNA,然后纯化cDNA,特异性PCR扩增,电泳,得到目的基因,然后连接载体pMD18-T上,再进行双酶切鉴定（或者测序）
希望解释清楚点,我知道pMD18-T载体是克隆载体,但是不知道与我的问题有没有关.
过程主要是：
从小麦胚胚芽鞘中提出总的RNA,反转录cDNA,然后纯化cDNA,特异性PCR扩增,电泳,得到目的基因,然后连接载体pMD18-T上,再进行双酶切鉴定（或者测序）
希望解释清楚点,我知道pMD18-T载体是克隆载体,但是不知道与我的问题有没有关.
赞 linguang99 春芽
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通常先分析一下目的基因上存在哪些常见的酶切位点,
再选择合适的克隆载体.保证你双酶切的位点在目的基因上不会出现.
PMD18-T克隆位点两侧的酶切位点比较多,很常用的.
再选择合适的克隆载体.保证你双酶切的位点在目的基因上不会出现.
PMD18-T克隆位点两侧的酶切位点比较多,很常用的.
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