我填测序单的时候是测通的,但是两次测序的结果都没有得到完整的基因序列,

我填测序单的时候是测通的,但是两次测序的结果都没有得到完整的基因序列,
我的序列长度是1020bp,但测得结果是从2-1017bp,我的载体是pet28a,是用通用引物测的
kurtali 1年前 已收到2个回答 举报

御姐loli 幼苗

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一般PET28a的通用引物为T7/T7TER,如果您所述的缺失在目的序列的一头一尾,那么应该是克隆之前的PCR扩增引物区域出现了碱基缺失.可能的原因是酶切过量,酶切时间太长或者是内切酶的特异性问题导致的.

1年前

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纷纷机将 幼苗

共回答了277个问题 举报

既然是通用引物肯定就不是从你序列的起始开始测啦,最好拿你PCR引物给他测序,这个长度也得从两边都测,一般测序只有8,9bp是准的

1年前

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