在生物实验中PCR的具体步骤是什么?

仙知 1年前 已收到3个回答 举报

summerfly010 幼苗

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类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成:
1.模板DNA的变性:模板DNA经加热至90~95℃一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
2.模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降...

1年前

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huanglu723 春芽

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步骤:
(一)预变性:
  破坏DNA中可能存在的较难破坏的二级结构。使DNA充分变性,减少DNA 复杂结构对扩增的影响,以利于引物更好的和模板结合,特别是对于基因组来源的DNA模板,最好不要吝啬这个步骤。此外,在一些使用热启动Taq酶的反应中,还可激活Taq酶,从而使PCR反应得以顺利进行。
(二)变性--退火--延伸循环:
  ①模板DNA的变性:模板DNA经加...

1年前

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幽澜花雨 幼苗

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体系是:PCR buffer,Taq酶,dNTPs,引物,模板,ddH2O补充至20ul或50ul体系。
举例:10 × buffer: 2 ul
dNTP(2.5mmol): 2ul
引物(2.5umol): 1.5ul
模板: ...

1年前

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