为什么做细胞实验的PBS缓冲液不含钙离子和镁离子?
为什么做细胞实验的PBS缓冲液不含钙离子和镁离子?
在将培养皿中的细胞吹下之前,需要将培养液倒掉,然后用不含钙离子和镁离子的PBS洗,才能加Trypsin,为什么必须是不含金属离子的PBS?原理是什么?而加了这两种离子的PBS是什么作用?
也就是说PBS都是不能加这两种离子的是吧？
麻烦还有个问题，三种细胞培养基IMDM、DMEM、1640有什么区别？
在将培养皿中的细胞吹下之前,需要将培养液倒掉,然后用不含钙离子和镁离子的PBS洗,才能加Trypsin,为什么必须是不含金属离子的PBS?原理是什么?而加了这两种离子的PBS是什么作用?
也就是说PBS都是不能加这两种离子的是吧？
麻烦还有个问题，三种细胞培养基IMDM、DMEM、1640有什么区别？
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因为：PBS中加入了Na2HPO4和0.24g KH2PO4,他们能与钙离子和镁离子,金属离子结合生成沉淀,
附：
0.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟）,保存存于室温或4℃冰箱中.
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒.
附：
0.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟）,保存存于室温或4℃冰箱中.
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒.
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你能帮帮他们吗