单酶切连接的问题?我是用XbaI单酶切PMD-19载体,将我的两端都是XbaI酶切位点的pcr产物连接上去,但是做了很久

单酶切连接的问题?
我是用XbaI单酶切PMD-19载体,将我的两端都是XbaI酶切位点的pcr产物连接上去,但是做了很久,一直都是T载体自连,没有将我的目的基因连接进去,请问高手到底应该怎么处理,注意哪些方面,
大中型vv 1年前 已收到1个回答 举报

1731s 花朵

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1确认连接体系没有问题.2 确认设计引物的时候两边酶切位点的碱基和保护碱基没有问题.3 考虑PCR产物回收产物浓度提高一点.连T一般很容易的,我也做的单酶切连接,祝成功啦.

1年前

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