λ噬菌体有极强的侵染能力,能在细菌中快速进行DNA复制,产生子代噬菌体,最终导致细菌破裂(称为溶菌状态);或者整合到细菌

λ噬菌体有极强的侵染能力,能在细菌中快速进行DNA复制,产生子代噬菌体,最终导致细菌破裂(称为溶菌状态);或者整合到细菌基因组中潜伏起来,不产生子代噬菌体(称为溶原状态).在转基因技术中常用λ噬菌体构建基因克隆载体,使其在受体细菌中大量扩增外源DNA,以备研究使用.相关操作如下图所示,请回答.

(1)组装噬菌体时,可被噬菌体蛋白质包装的DNA长度约为36~51kb,则经人工改造的λgtl0载体可插入的外源DNA的最大长度为______kb.人工改造载体时,为获得较大的插入能力,可删除λ噬菌体DNA组成中的______ 序列以缩短其长度.
(2)λ噬菌体DNA上通常没有适合的标记基因,因此人工改造时需加装适合的标记基因,如上图λgtl0载体中的imm434基因.该基因编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物.构建基囚克隆载体需用到的酶是______,外源DNA的插入位置应位于imm434基因______ (之中/之外),使经侵染培养后的受体菌处于______状态.
(3)蛋白质与DNA相比,特有的化学元素是______,若用放射性同位素标记该元素,再用被标记的噬菌体侵染未被标记的细菌,短时保温后搅拌、离心,可检测到放射性物质主要分布在试管______ 部分.
_yo_s5f09u_j159b 1年前 已收到1个回答 举报

gulong1234 幼苗

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解题思路:λ噬菌体DNA中分为三段,左臂是含有编码蛋白质外壳的序列,中臂是控制溶原生长的序列,而右臂是含重要调控序列,所以人工改造载体时,可删除的是中臂.经人工改造λgtl0载体的长度为43.4kb.T2噬菌体侵染细菌的实验步骤:分别用35S或32P标记噬菌体→噬菌体与大肠杆菌混合培养→噬菌体侵染未被标记的细菌→在搅拌器中搅拌,然后离心,检测上清液和沉淀物中的放射性物质.

(1)由于组装噬菌体时,可被噬菌体蛋白质包装的DNA最大长度是51kb,经人工改造λgtl0载体的长度为43.4kb,那么插入的外源DNA的最大长度是7.6kb.由于λ噬菌体DNA中分为三段,左臂是含有编码蛋白质外壳的序列,中臂是控制溶原生长的序列,而右臂是含重要调控序列,所以人工改造载体时,可删除的是中臂.
(2)基因工程中需要用到限制酶和DNA连接酶来切割和拼接DNA片段.由于采用的标记基因,即imm434基因,能编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物,所以外源DNA应该插入该基因之中,这样就使得经侵染培养后的受体菌处于溶菌状态.
(3)蛋白质与DNA相比,特有的化学元素是S元素,采用放射性同位素标记方法,用被标记的噬菌体侵染未被标记的细菌,短时保温后搅拌、离心,可检测到放射性物质主要分布在试管的上清液中,因为噬菌体中含有S的蛋白质外壳是不进入细菌体内的.
故答案:(1)7.6控制溶原生长(或中部)
(2)限制酶和DNA连接酶之中溶菌
(3)S上清夜

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术;噬菌体侵染细菌实验.

考点点评: 本题综合流程图,考查基因工程、噬菌体侵染细菌实验的应用,意在考查考生分析题图提取有效信息的能力;能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力;能运用所学知识,解决生物学问题的能力和迁移应用能力.

1年前

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