HPLC时,样品和溶剂一起出峰做HPLC时,用甲醇溶解样品,总时会在甲醇出峰时间把样品带出,然后样品峰很小,溶剂峰很大,

HPLC时,样品和溶剂一起出峰
做HPLC时,用甲醇溶解样品,总时会在甲醇出峰时间把样品带出,然后样品峰很小,溶剂峰很大,不管怎样改变样品浓度,总是会溶剂峰比样品峰大,有没有高手可否告知是什么原因?

meixinren 1年前已收到2个回答举报

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楼上需确认几个问题：
1、主峰定位是否有问题,确定是和甲醇一起出峰吗?
2、所用波长为多少?是末端吸收吗?
我认为首先应确认主峰的最大吸收波长,主峰是否有紫外吸收.
如果主峰总是和甲醇峰一起出峰,说明被测样品的极性较大,楼主所用色谱条件不适合该样品的分析,应考虑采用其他色谱条件进行分析.

1年前追问

meixinren 举报

谢谢您的回答，再追问下: (1) 样品最大吸收波长在265nm。(2)用空白甲醇的时候也是在那个时间出峰，但峰度较小，随着样品的浓度增大，峰会增大。流动相是用的甲醇，水和2%乙酸，改变流动相，如果甲醇比例降低，水升高时，样品峰和甲醇峰是能分开，但有样品或者样品浓度高的时候随之甲醇保留时间出来的峰也会增高，这是否就是因为样品极性大的原因，要用什么方法才能做到分离？求高手指教，谢谢！

举报怕输才不怪

您的样品可能极性较大，可试着调节流动相的pH值，也可以在流动相中增加离子对试剂。

离你一海里幼苗

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1年前

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