经初步纯化后的蛋白质样品,如果用层析法检测显示只有一个峰,是否可以认为该纯化样品只含有一种蛋白?

经初步纯化后的蛋白质样品,如果用层析法检测显示只有一个峰,是否可以认为该纯化样品只含有一种蛋白?
这两道题一个问法,就是略有区别在所用的层析法.具体题目如下：
1,经初步纯化后的蛋白质样品,如果用凝胶过滤层析法检测显示只有一个峰,是否可以认为该纯化样品只含有一种蛋白?如果不能这样认为,那么可能存在的杂蛋白和目的蛋白有什么样的相似性?请举出一种可以证明杂蛋白存在的方法,并说明此种方法依据的原理.
2,经初步纯化后的蛋白质样品,如果用离子交换层析法检测显示只有一个峰,是否可以认为该纯化样品只含有一种蛋白?如果不能这样认为,那么可能存在的杂蛋白和目的蛋白有什么样的相似性?请举出一种可以证明杂蛋白存在的方法,并说明此种方法依据的原理.
如果上面两道题改成电泳法,超离心法呢?因为我要准备考试,要答在卷面上.

头晕晕的 1年前已收到1个回答举报

舞者_桑度幼苗

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二者均不能.需要考虑纯化的原理.柱层析法的原理是根据蛋白质的分子量来进行纯化,所以可能存在和目的蛋白相同分子量的杂蛋白.（不考虑蛋白之间的相互作用）证明方法：可以用某种特定的蛋白酶去切蛋白质样品.切完后再过柱子.如果还有原来的峰则证明有杂蛋白存在.
第二种方法也类似.离子交换层析的原理是根据蛋白质的等电点来纯化的.
电泳法也是根据分子量来判断.超速离心是根据沉降系数来分离的.这些都没办法彻底排除杂蛋白的影响.要排除得去考虑蛋白质的氨基酸序列.这样才能彻底排除干扰.

1年前追问

头晕晕的举报

可能存在的杂蛋白和目的蛋白有什么样的相似性？过滤层析法是相似的分子量，离子交换层析法是相似的等电点，电泳法是相似的分子量和电荷数，超速离心是相似的沉降系数，我是应该这么理解，这么回答吗？
你说这些都没办法彻底排除杂蛋白的影响，要排除得去考虑蛋白质的氨基酸序列。请问，你说考虑蛋白质的氨基酸序列的这个能得到纯的蛋白质的方法叫什么名字？
麻烦你了，谢谢啊！！

举报舞者_桑度

可以这样理解。
电泳法可能加入SDS，会将蛋白分解成一条一条肽链，并且SDS会掩盖原来蛋白的电荷，所以电泳法的分离依据可能只是分子量。不过也有的电泳不加SDS。不过电泳的时候应该会掩盖蛋白质原本的电性。（为了实现单一变量）
要排除影响的话可以用多种方法共同处理这个样品，物理性质完全相同的两个蛋白在蛋白纯化中比较少见。这样的做法算是一般的方法吧。
更精细的得考虑化学方法。比如可以做蛋白质酶切，比较切完之后的短肽。或者去做蛋白质的测序。这些方法比较麻烦。至于方法的名字，就写蛋白质测序吧。

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