RNA根据光密度求纯度.题：某RNA完全水解得到四种单核苷酸样品500mg,用水定容至50ml,吸取0.1ml,稀释到1

RNA根据光密度求纯度.
题：
某RNA完全水解得到四种单核苷酸样品500mg,用水定容至50ml,吸取0.1ml,稀释到10ml,测260nm处光密度为1.29.已知四种单核苷酸的平均相对分子质量为340,摩尔消光系数为6.65×10^3,求该产品的纯度.
请问公式是什么啊?书上关于光密度好像没提及到.
我都不懂什么叫光密度,以及摩尔消光系数.
答案只给了一串式子.
(1.29×340)/(6.65×10^3)=0.066 0.066×100%/0.1=66%

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cornerling 幼苗

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是求浓度吧……
核酸溶液测对260 nm波长的紫外光的吸光度,再通过朗伯-比尔定律计算浓度,这是实验室里常用的测定核酸浓度的方法.这里是要由吸光度求浓度,再求物质的量,最后反推出纯度（假设杂质在260 nm没有吸收）.

以上是朗伯-比尔定律的公式,其中,
A ：吸光度（也叫"光密度 Optical Density",简称O.D.）；
I0：入射光的强度；
It：透射光的强度；
T：透射比,或称透光度；
K：消光系数或者摩尔消光系数,摩尔消光系数单位一般是L/(mol·cm）
l：吸收介质的厚度（也就是光路在介质中的长度）,一般以 cm 为单位,如果没有特别提及,默认是 1 cm

c：吸光物质的浓度,单位可以是 g/L 或 mol/L.

1年前追问

失忆男人举报

谢谢你的回答，但还是有疑问。根据你的公式，A就是光密度，是求c。那为什么是答案中出现的是1.29×340，不是直接1.29？L是1，所以省略不写吧？还有就是前面的500m定容到50ml，那就是10mg/ml 吧，提取0.1ml，就是提取1/50mg样品，（是关注这个么？还是关注浓度？）又稀释到10ml，有对结果有什么影响么？不明白。求再给解答下。谢谢，谢谢。

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1 吸取0.1 ml稀释到10 ml，则稀释倍数是 100 倍。 2 根据吸光度测得的浓度是 c2 = A/K = 1.29/(6.65×10^3) mol/L 原浓度c1 = 100×1.29/(6.65×10^3) mol/L 则原溶液中核苷酸总质量为 100×1.29/(6.65×10^3) mol/L × 0.05 L × 340 g/mol 样品纯度为 100×1.29/(6.65×10^3) mol/L × 0.05 L × 340 g/mol / 500 mg = 66.0%

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