以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个目的蛋白质基因,并使之在大肠杆菌中表达?

以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个目的蛋白质基因,并使之在大肠杆菌中表达?
简单描述实验设计方案!
心静如水501 1年前 已收到1个回答 举报

落寞妖精 幼苗

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大肠杆菌是原核生物,目的蛋白质基因如果是原核生物的基因:经测序正确后,利用PCR扩增该基因,酶切连接到质粒,转化大肠杆菌筛选阳性克隆,鉴定正确后诱导表达。通常是用IPTG诱导
目的蛋白质基因如果是动物基因是真核基因,直接用限制酶切获得的基因在大肠杆菌内表达会错误,应该选择动物的相应基因的mRNA反转录得到DNA,或者根据相应蛋白质的氨基酸排列顺序推测DNA的碱基序列获得DNA。其余...

1年前

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