提取贴壁细胞的DNA一定要用蛋白酶K和RNaseA吗

提取贴壁细胞的DNA一定要用蛋白酶K和RNaseA吗
如果不用它们会有什么影响,对后期的PCR有影响不
或者有什么好的方法介绍一下,要步骤的那种
130XXX70888 1年前 已收到1个回答 举报

小静315 幼苗

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1、你说的那种方法是用蛋白酶K消化然后酚氯仿抽提的方法,这种方法中蛋白酶K可以消化掉各种蛋白,释放出各种核酸(包括RNA),RNaseA可以用来消化掉RNA,那么就只剩下DNA了.这种方法中蛋白酶K和RNaseA是必须的,不加蛋白酶K的话核酸释放不充分,而且提取的DNA中容易出现蛋白污染,不加RNaseA的话可能会导致提取的DNA中残留有RNA.
2、提取贴壁细胞的方法很多,你用PBS洗涤一下细胞,然后刮下来或者用酶消化细胞后离心收集之后就可以用随便什么方法提取了,说的那种方法可靠的,嫌麻烦的话就用试剂盒,比如天根的血液组织细胞基因组提取试剂盒(DP304)

1年前

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