根据已知基因mRNA保守序列设计多对引物,然后在基因组上p相应片段,却老是p不出来,或者p出来较亮的片段测

天香飘梦 1年前 悬赏5滴雨露 已收到2个回答 我来回答 举报

文采不错 幼苗

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基因含有内含子,导致基因序列过长,不能得到有效的扩增!你扩出较亮的条带应该是比较短的!你可以把你得到的短的序列测序,然后再设计引物,往两端扩,或者就用染色体步移法,一点一点的扩增!

1年前

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shengjunlou 幼苗

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先考虑是不是跨内含子了。确定PCR没有问题,注意设阳性对照(相同模板,不同引物扩增)。如果PCR本身没有问题,应该就是你的引物跨内含子。换非翻译区的设计引物吧。

1年前

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