反向层析的原理固定相为极性基团,氰基、氨基及双羟基三种.流动相为非极性或极性较小的溶剂.极性小的组份先出峰,极性大的后出

反向层析的原理
固定相为极性基团,氰基、氨基及双羟基三种.流动相为非极性或极性较小的溶剂.极性小的组份先出峰,极性大的后出峰,这称为正相层析法,适用于分离极性化合物.
固定相为非极性基团,如十八烷基（C18）、辛烷基（C8）、甲基与苯基等,流动相用强极性溶剂,如水、醇、乙腈或无机盐缓冲液.最常用的是不同比例的水和甲醇配制的混合溶剂,水不仅起洗脱作用还可掩盖载体表面的硅羟基,防止因吸附而至的拖尾现象.极性大的组份先出峰,极性小的组份后出峰,恰好与正相法相反,故称反相层析.本法适用于小分子物质的分离,如肽、核苷酸、糖类、氨基酸的衍生物等.