western blot图中,IP IB Flag

western blot图中,IP IB Flag
左边那些VEGFR-3-Flag,p85α-HA IB:Flag IB:HA



我稍微有点明白了,但还是有几点不明白:
(1)“从最右边看,表示细胞再转染了这三种质粒后,能够在细胞中表达”怎么看出来表达了?为什么要做lysate的westernblot图呢?
(2)你说的看最右边、中间、左边的图是指最右边、中间、左边上下两个图对着比较吗?(3)你说的“研究片段”指的是SH2?
(4 ) 还有拉不拉不出来怎么看?互相之间能被拉就是说有相互作用?比如说最左边的图是不是应该看左下图左右之间的条带粗细对比,中间的图是看中上图左右之间的条带粗细对比
(5)‘相互作用的位点不在其SH2上“ 这个结论不懂,既然是缺失SH2的P85不能被VEGFR拉出,但正常的P85能被VEGFR拉出,不正说明了作用位点在SH2上吗?
还望大神不吝赐教!菜鸟跪谢啦
domodomoko 1年前 已收到1个回答 举报

燕石竹 幼苗

共回答了22个问题采纳率:90.9% 举报

IB是免疫印记、IP是免疫共沉淀、Flag和HA都是一种蛋白标签
从最右边看,表示细胞再转染了这三种质粒后,能够在细胞中表达,最左边的图是用带有Flag标签的VEGFR拉p85及其研究片段,从图中可以看出,p85被拉出,而其研究片段没有被拉出,中间的图是反过来用p85及其研究片段拉VEGFR,同样可以看出p85可以把VEGFR拉出,而其研究片段没有被拉出,结论是VEGFR与P85存在相互作用,但是相互作用的位点不在其SH2上

1年前 追问

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domodomoko 举报

这些概念我百度到了,主要是我不明白这图应该怎么看啊?

举报 燕石竹

后边我说的很详细了,希望能帮到你

domodomoko 举报

大神,能再帮我解答一下吧,问题有点多没法追问,我添加到问题里啦!谢谢!

举报 燕石竹

能不能拉出来都需要对比着条带的位置去看,如果那个地方有条带,代表能拉的出来。做lysate的westernblot图是为了证明质粒是可以正常表达的,也就是说质粒是没有问题的,这是前提。 由于毕业太久了,对一些表示方法有些淡忘,这里更正一下,非常抱歉,结论应该是VEGFR与P85存在相互作用,相互作用的位点在其SH2上。非常抱歉

domodomoko 举报

真的很感谢你耐心的解答!谢谢!
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