什么是基因组DNA污染?为什么设计引物时要跨外显子?

提RNA的时候有可能混了基因组DNA.
这样的话,PCR的时候,假如这个基因根本没表达,结果因为混了DNA进去,PCR就可以P出结果.但是这个条带不是从RNA来的.这就是DNA污染,它会干扰PCR的结果.
可以在提取RNA后,用DNA酶处理,这样分解可能混入的DNA来避免.也可以通过合理设计引物来避免,即使有DNA混入,这样设计的引物也只扩增RNA,而不扩增DNA.
这就要求引物得最好设计成跨外显子接头.因为DNA上的基因外显子和内含子是隔开的,而RNA上内含子被切掉了,是外显子链接在一起.剩下的,自己想去吧,已经快接近结果了……

孩子，一楼的是对的。rna是不包含内含子的。所以你在基因组前一个外显子中设计正向引物，后一个设计反向引物，cDNA就能p出相应条带，而基因组dna由于中间还有一段内含子，要嘛由于条带太大p不出来，就算p出来你也可以识别。其实关键还是做好dna消化。做完之后跑带确认就行了。...

就是你的引物一定要具有特异性，如果你设计的引物可以扩出好几个基因，这就是DNA污染了，跨外显子是为了确保所扩大基因能够编码功能蛋白，是自己所要研究的目的基因！

科技名词定义
中文名称：人类基因组计划 英文名称：human genome project;HGP;Human Genome Project 定义1：于20世纪80年代提出的，由国际合作组织包括有美、英、日、中、德、法等国参加进行了人体基因作图，测定人体23对染色体由3×109核苷酸组成的全部DNA序列，于2000年完成了人类基因组“工作框架图”。2001年公布了人类基因组图谱及初步分析结...