（2011•静安区一模）（四）生物技术广泛应用于医疗、农业、工业等领域．下列是与生物工程类相关的问题：

Ⅰ（1）植物油属于脂肪中的一种，其元素组成只有CHO，因此筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源．培养基灭菌采用的最适方法是高压、高温、蒸汽灭菌法．
（2）可利用固定化酶技术使脂肪酶能够重复使用．
（3）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的PCR（或：多聚链式反应，聚合酶链式反应）技术．
Ⅱ（1）DNA分子的热稳定性与DNA分子中的氢键有关，氢键越多越稳定．而在DNA分子中存在A-T、C-G两种碱基对，其中A和T之间有两个氢键连接，而C和G之间以三个氢键连接，因此C-G碱基对比例越高，DNA分子越稳定，因此四种酶切位点相比较，Sma I酶切位点结构最稳定．
（2）图中质粒的标记基因为抗生素抗性基因，而Sma I的切割位点就在该基因上，SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因，因此不能使用Sma I切割．
（3）由于同种限制酶切割形成的黏性末端相同，为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状，不能使用EcoRⅠ．
（4）为了检测基因转导的成功，需要在培养微生物的培养基中加入抗生素，若微生物能正常生长，说明转导成功．
故答案为：
Ⅰ．（1）碳源高压、高温、蒸汽灭菌
（2）固定化酶
（3）PCR（或：多聚链式反应，聚合酶链式反应）
Ⅱ．（1）碱基C-G具有三对氢键
（2）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
（3）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
（4）抗生素

点评：
本题考点： 培养基对微生物的选择作用；制备和应用固相化酶；基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查了微生物培养和基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和分析能力，难度适中．考生要能够识记培养基灭菌的一般方法，识记PCR技术的应用；理解运用不同的限制酶切割可以防止自身环化；并且理解C-G碱基对与DNA分子稳定性之间的关系．