feeling8085
幼苗
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在做基因重组时载体必须得有标记基因,这样就易于筛选,载体一般常用质粒.这就好比我们认识某个人时首先得记住某人的特征才记住这个人一样,这样就在很多人中一眼就可以知道那个人了,一样的道理.有什么问题可以继续讨论.
1年前
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cswtt
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标记基因是在质粒上的,就算没导入目的基因,质粒上还是有标记基因。 按你说就是 能使它在抗生素培养基生长的基因 和是否导入目的基因了有什么关系
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feeling8085
你的想法很好,这是因为基因工程在高中课标中要求的不是很高,具体的涉及到大学分子生物学知识。这个问题是质粒的概念了,质粒分为克隆载体和表达载体,常用的是pBR322质粒,具体你可以看看: pBR322质粒 pBR322质粒DNA分子的长度为4363bp,此载体中有两个标记基因,一个是氨苄青霉素抗性基因(Apr),另一个是四环素抗性基因(Tetr)。现在已知pBR322DNA分子共有24种核酸内切限制酶的单一识别位点。其中7种限制酶(从12:00位置按顺时针方向)即EcoRV、NheI、BamHI、SphI、SalI、XmaⅢ和NruI的识别位点位于四环素抗性基因内部,另 外有2 种限制酶即ClaI和HindⅢ的识别位点是存在于这个基因的启动区内,在这9个限制位点上插入外源DNA都会导致tetr的失活。3种限制酶即 ScaI、PvuI和PstI的识别位点位于氨苄青霉素抗性基因内,在这些位点插入外源DNA则会导致ampr基因的失活。由pBR322质粒载体的结构可知其具有如下优点:⑴具有较小的分子量。经验表明,为了避免在DNA的纯化过程中发生链的断裂,克隆载体的 分子大小最好不要超过10Kb。pBR322质粒这种小分子量的特点,不仅易于自身DNA的纯化,而且可容纳较大的外源DNA片段;⑵具有两种抗菌素抗性 基因可供作转化子的选择记号,能指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞以及外源DNA分子是否插入载体分子形成了重组子。标记基因往往可以赋予宿主细胞一种新的表型,这种转化细胞可 明显地区别于非转化细胞。当我们把一个DNA片段插入到某一个标记基因内时,该基因就失去了相应的功能。当把这种重组DNA分子转到宿主细胞后,该基因原 来赋予的表型也就消失了。要是仍保留了原来表型的转化细胞,细胞内含有的DNA分子一定不是重组子。很显然,既要指示外源DNA是否进入了宿主细胞,又要 指示载体DNA分子中是否插入了外源DNA片段,那么这种载体必须至少具有两个标记基因。另外,pBR322质粒载体还具较高的拷贝数,而且经过氯霉素扩 增之后,每个细胞中可积累1000~3000个拷贝,这就为重组体DNA的制备提供了极大的方便。