做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因?

g131466 1年前 已收到2个回答 举报

zhuzj1228 幼苗

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上下引物的 Tm最好相似,不能差异太大,不然不好设计退火温度;
内参条带很亮,说明RT应该没多大问题,问题可能出现在PCR上.
没有目的基因是因为
1 该基因确实不表达;
2 你的引物不特意,到NCBI的PrimerBlast 看看;

1年前

2

袁小七 幼苗

共回答了205个问题 举报

做个梯度试试

1年前

2
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