分子生物学实验中PCR各组分的作用

rebreath 1年前 已收到2个回答 举报

Chouyajj 春芽

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PCR,即链式酶聚合反应,反应管中各组分如下:
扩增缓冲液:
缓冲液有助于酶的稳定,是给聚合酶提供一个最适合酶催化反应条件;
4种dNTP混合物:
四种脱氧核苷酸,是DNA的原料;
引物:
DNA合成不能从零开始,必须要有引物,从引物末端开始延伸,合成整条链;
模板:
DNA合成需要模板链;
Taq DNA聚合酶:
催化PCR反应,该酶是从Thermus aquaticus细菌中提取的特殊的耐热DNA聚合酶,可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本;
Mg2+:
Mg与dNTP以及DNA模板结合形成复合体,只有这种复合体才能被DNA聚合酶识别;
加双或三蒸水:
调节反应体系的浓度用;

1年前

11

lztwxp 幼苗

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类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时
间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至40~60℃左右,引物与...

1年前

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