我想做胰岛素导入大肠杆菌的基因克隆实验.在ncbi中查找到了cdna,准备跑pcr,这个时候需要提取出cdna模

我想做胰岛素导入大肠杆菌的基因克隆实验.在ncbi中查找到了cdna,准备跑pcr,这个时候需要提取出cdna模
需要从人体中提取cdna模版吗?还是去基因公司合成基因片段比较好?pcr可以只提供基因序列,不提供基因模版做吗
木贼麻黄 1年前 已收到1个回答 举报

静静了 幼苗

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  PCR必须有模板.
  通过RT-PCR获得胰岛素cDNA很麻烦,因为表达胰岛素mRNA的组织或细胞非常局限.你要么需要找到人的B细胞系(这个细胞系不好要也不好养),要么需要联系医院获得人的胰腺组织.这两条路都比较麻烦.
  可行的办法有几个:要么是全基因合成,大概3元/碱基.要么是联系origene公司购买胰岛素cDNA,价格不贵,不比你自己克隆cDNA成本高.要么直接联系其它实验室,所要胰岛素cDNA.

1年前

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