发现一个细胞膜蛋白,序列分析发现是一个多次跨膜蛋白.请设计实验确定跨膜次数及其末端朝向.

给个方向吧,其实把题变一下更好：你新发现一个细胞膜蛋白,通过序列分析发现是一个多次跨膜蛋白.为了确定跨膜次数及其末端朝向,你在细胞内高表达了该蛋白,然后通过免疫荧光术去标记细胞.当你用抗N端抗体直接标记活细胞时,出现膜上荧光,而用抗C端抗体时却没有.用甲醇固定细胞（此时细胞膜被破坏）后,则两种抗体都出现膜上荧光标记.将细胞膜分离纯化,然后用蛋白酶充分降解膜外部分,再经SDS-PAGE和银染,发现有10条主带,其中三条在对照细胞（即仅转染了空质粒载体的细胞）的相应样品中也有.如果先用蛋白酶处理,再分离细胞膜,那么,你会发现6条主带,而对照样品有其中的两条.从这些结果,你能得出什么结论?在此之后,你打算开展哪些方面的研究?

根据后面的完善，我们可以知道，该蛋白N端在胞外，C端在胞内，为7次跨膜蛋白，空质粒跑出的条带应该是报告基因表达的整合蛋白，接下来可以采用疏水性作图等方法研究跨膜结构域，以及合成cDNA，点突变等方法研究其功能！