回答有关生物技术的问题.Ⅰ、抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两种合成途径的研究.如图是生物学技术制备抗体的两个途径

回答有关生物技术的问题.
Ⅰ、抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两种合成途径的研究.如图是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图1.

(1)在获取抗体之前,需要向健康人体注射特定抗原(如乙肝疫苗),并且每隔一周重复注射一次.免疫学细胞A在人体主要介导______免疫.
(2)过程①至②抗体的获取称为______,其中①是______过程.
Ⅱ、图1中,结构甲的建构可用图2和3表示.图2表示含有目的基因的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图3表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为下表所示.
限制酶MspⅠBamHⅠMboⅠSmaⅠ
识别序列及切割位点



(3)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为______.
(4)若图2中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从杂合子中分离出图1及对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有______种不同长度的DNA片段.
(5)若将图3中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行拼接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______.在导入重组质粒后,为了筛选出含有重组质粒的大肠杆菌,一般需要添加______的______(固体/液体)培养基进行培养.在培养前,培养基必须先经过灭菌,所用的方法是______;采用______的方法接种以获得单菌落后继续筛选.
11yy11 1年前 已收到1个回答 举报

wei798 幼苗

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解题思路:分析图1,细胞A表示效应B细胞,细胞Y表示杂交瘤细胞,①过程表示动物细胞融合,②过程动物细胞培养,③过程提取信使RNA,④过程表示逆转录,⑤表示基因表达载体的构建,⑥表示导入受体细胞.
分析图2,DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点,第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置;第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置.
分析图3,若使用MboI会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamHI来切割目的基因和质粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于筛选出含有重组质粒的受体细胞.

(1)向健康人体注射特定抗原,提取出A浆细胞(效应B淋巴细胞),在人体参与体液免疫.
(2)过程①至②抗体的获取称为单克隆抗体,其中①是细胞融合过程,Y细胞称为杂交瘤细胞.
(3)SmaⅠ识别的序列为GGGCCC,切割会产生平末端;图1中DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点,第一个识别位点在左端534 bp序列向右三个碱基对的位置;第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置,从而两个位点切割后产生的DNA片段的长度分布为534+3,796-3-3,658+3,即得到的DNA片段长度为537、790、661.
(4)在杂合子体内含有基因D和基因d,基因D的序列中含有两个识别位点,经过SmaI完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段,基因d的序列中含有一个识别位点,经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段,综上,杂合子中分离到该基因的DNA片段经过切割后会产生4种不同长度的片段.
(5)能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的MboI,若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamH I来切割目的基因和质粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌.因为目的基因和运载体是用同种限制酶切割的,目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补,可能出现目的基因反向连接在运载体上的情况,导致基因D不能正确表达.在培养前,培养基常用高压蒸汽灭菌;采用划线(或涂布)的方法接种以获得单菌落后继续筛选.
故答案为:
(1)体液
(2)单克隆抗体 细胞融合
(3)537、790、661
(4)4
(5)BamHⅠ抗生素B 固体 高压蒸汽灭菌 平板划线(或涂布)

点评:
本题考点: 单克隆抗体的制备过程;基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查单克隆抗体的制备、基因工程、微生物的培养等相关知识,意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等.

1年前

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