质粒跑电泳大提质粒,未酶切三条带,超螺旋、开环、线性,下面没有其他的杂带了,单酶切也是一条带,而双酶切,却出现三条带,多

质粒跑电泳
大提质粒,未酶切三条带,超螺旋、开环、线性,下面没有其他的杂带了,单酶切也是一条带,而双酶切,却出现三条带,多出了一条,多出的一条750,比正常的400那条带颜色浅.这是为什么呢?
拉丁红 1年前 已收到2个回答 举报

楼民33号 幼苗

共回答了25个问题采纳率:92% 举报

这个可能性很多啊.
最大的可能是你的酶污染了其他酶.
还有这种问题你要是觉得其他两条带大小正确,就不要太纠结了,往后做吧.
如果非得找原因的话,再重复几次,酶用量,酶切时间之类的多考虑点.

1年前 追问

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拉丁红 举报

已经跑了四次了,其中有两次看到的多余的那条带,很浅很浅,不仔细看,都看不出来, 我这个质粒要打入动物体内,如果质粒有问题,那免疫试验就不会有好的结果了

举报 楼民33号

测序了吗?DNA疫苗的载体是自己构建的?载体切过吗?目的基因原核表达做了吗?WB呢?目的基因验证过了,载体验证过了,就不用担心了啊。

拉丁红 举报

质粒是拿到公司构建的,测序过了,没有问题,我的那个基因是不表达的 这是第二次做实验,第一次做实验的时候,提的质粒,一点问题都没有

举报 楼民33号

公司做的,尽管去咨询他们吧,这是售后服务。 不过估计他们也会说你的酶污染了。。。

爱娜梨梨 幼苗

共回答了29个问题 举报

能不能再描述一遍?不懂你写的啥

1年前

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