粗提表达产物浓度(μg/ml) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 |
活的内皮细胞数目(x100) | 12 | 6 | 2 | 1 | 0.5 | 0.5 |
乐乐__ 春芽
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(1)从肝细胞中分离出相应的RNA,经反转录(或逆转录)获得内皮抑素基因,再利用PCR技术进行体外扩增,以获得更多的目的基因.
(2)双酶切后,目的基因两端的黏性末端不同,被切开的运载体两端的黏性末端也不同,这样可以避免目的基因与载体反向连接,还能减少目的基因与目的基因、载体与载体的连接,提高了重组质粒的比例.
(3)大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因,LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和Xgal时,Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落.反之,则形成白色菌落.选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入的物质有IPTG、X-gal和氨苄青霉素.因为重组质粒的LacZ基因中插入了目的基因,使LacZ基因不能表达出β-半乳糖苷酶,所以成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成白色菌落.
(4)由表中数据可知,粗提表达产物浓度越高,活的内皮细胞数目越少,说明重组内皮抑素(或粗提表达产物)能够抑制毛细血管内皮细胞的增殖.
故答案为:(1)反转录 PCR (2)反向
(3)IPTG、X-gal和氨苄青霉素 白 重组质粒上的LacZ基因已被破坏而不能表达
(4)对活细胞进行计数 内皮抑素能有效地抑制血管增生
点评:
本题考点: 基因工程的应用.
考点点评: 本题考查基因工程的相关知识,意在考查考生的理解应用能力和信息转化能力,属于中等难度题.
1年前
1年前1个回答
医学生理学中表达于什么意思?比如细胞间黏附分子1表达于血管内皮!
1年前1个回答
1年前1个回答
你能帮帮他们吗