（2013•浙江模拟）利用以下提供的酶和质粒，选用合适的酶切后构建了满足筛选需求的目的基因-质粒连接物（标为D）下列有关

（2013•浙江模拟）利用以下提供的酶和质粒，选用合适的酶切后构建了满足筛选需求的目的基因-质粒连接物（标为D）下列有关叙述中，错误的是（　　）

限制酶	BamHⅠ	MboⅠ
识别序列及切割位点	G↓GATCC CCTAG↑G	↓GATC CTAG↑G

A．DNA上的每个酶切位点只能被一种特定的限制性核酸内切酶剪切
B．构建连接物D时只能用BamHⅠ剪切质粒，而不能选用MboⅠ
C．连接物D有两种，而其中只有一种能满足基因工程的表达要求
D．连接物D中MboⅠ的酶切位点至少有3个，而BamHⅠ的切点可能没有

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淡水271 春芽

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解题思路：限制酶：主要从原核生物中分离纯化出来．特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
据图分析，BamHⅠ和MboⅠ能形成相同的黏性末端；质粒中抗生素A抗性基因是BamHⅠ和MboⅠ的识别和切割位点；抗生素B抗性基因是MboⅠ的识别和切割位点．

A、据表格分析，BamHⅠ和MboⅠ的识别序列不同，但限制酶MboⅠ能切割BamHⅠ的识别位点，A错误；
B、分析质粒，MboⅠ的识别位点有2个，质粒将形成两个线性片段，不利于目的基因的连接，而且所有的标记基因都被破坏，B正确；
C、目的基因插入的方向有两种情况，但转录只有一种方向，C正确；
D、假如用限制酶BamHⅠ处理质粒插入目的基因后，形成的连接物D中MboⅠ的酶切位点至少有3个，位于抗生素B抗性基因和目的基因的两侧；如目的基因插入位点是抗生素A抗性基因，则形成重组质粒后，BamHⅠ的酶切位点有2个，位于目的基因两侧；如目的基因插入位点是抗生素B抗性基因，则形成重组质粒后，BamHⅠ的酶切位点有1个，位于抗生素A抗性基因；如用MboⅠ的酶处理质粒插入目的基因后，则BamHⅠ的酶切位点有0个，D正确．
故选：A．

点评：
本题考点：基因工程的原理及技术．

考点点评：本题考查基因工程中限制酶的功能，意在考查学生分析问题和解决问题的能力．

1年前

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