大肠转化后提的质粒,跑电泳出现3条带,求高人解释每条带分别是什么?(第一列是空质粒)

371275664 1年前 已收到2个回答 举报

chengli75 幼苗

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  质粒DNA分子具有三种构型:共价闭合环DNA(cccDNA,SC构型)、开环DNA(OC构型)和线性分子(L构型).在细菌体内,质粒DNA是以负超螺旋构型存在的.在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同,但具有不同的电泳迁移率.其中跑在最前沿的是共价闭合DNA,其后依次是线性DNA和开环DNA,其原因是共价闭合的DNA其空间位阻最小,所以跑得最快.而开环DNA空间位阻最大,所以跑得最慢.
  不过并不是每次提取的质粒都有三条带,两条带的情况也很多见,如你的空质粒.

1年前

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lianzi21 幼苗

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从上往下
第二个是超螺旋(ccc型)
第一个(最慢的)应该是是开环oc 线性可能性不大
第三个最快的那个 是比超螺旋还快的一个状态 是什么我也不知道 偶尔能看见 还不容易酶切开

一般提质粒大多数只能看到两条带 oc和ccc

以上是个人经验 虽然教科书上说的ccc oc l三种构型 但在实际中一般看不到L 但...

1年前

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