(2013•南通一模)利用转基因奶牛乳腺生物发应器生产人的生长激素,需要构建一种能高水平表达的表达载体,选择合适的基因启

(2013•南通一模)利用转基因奶牛乳腺生物发应器生产人的生长激素,需要构建一种能高水平表达的表达载体,选择合适的基因启动子至关重要.由于无法由基因表达产物推知启动子的碱基序列,运用PCR技术单独克隆启动子存在困难.科研人员经过长期研究,终于发明了下图所示的一种克隆启动子的方法.请回答:

(1)培育转基因奶牛时,需要在生长激素编码序列前插入______的启动子.
(2)由基因表达产物无法推知启动子碱基序列,其原因是______.
(3)过程①需选择的限制酶是______,过程③需选择的限制酶是______.过程④需要使用的工具酶是______.
(4)过程④中可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计______进行扩增.扩增过程中,在第______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段.
(5)过程⑤中将克隆的启动子与外源基因编码序列连接时,原引物a所在的P片段的碱基对数目应是3的整数倍,目的是______.
kingdomhao 1年前 已收到1个回答 举报

开火车去nn 幼苗

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解题思路:分析题图:外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、MboⅠ、HindⅢ的识别序列和切割位点,且限制酶BamHⅠ和MboⅠ的识别序列相同,用限制酶HindⅢ、MboⅠ和HindⅢ切割都会破坏目的基因.①表示获取目的基因的过程;②表示基因表达载体的构建过程;③表示将基因表达载体中的目的基因切开;④表示采用PCR技术体外扩增目的基因.

(1)培育转基因奶牛时,根据基因的选择性表达原理,需要在生长激素编码序列前插入乳腺蛋白基因的启动子,使生长激素编码序列只在乳腺组织细胞中表达.
(2)因为基因中启动子的碱基序列不能被转录,所以由基因表达产物无法推知启动子碱基序列.
(3)含有目的基因的外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、MboⅠ、HindⅢ的识别序列和切割位点,但是用限制酶HindⅢ、MboⅠ和HindⅢ切割都会破坏目的基因,所以过程①应选择限制酶BamHⅠ.而限制酶BamHⅠ和MboⅠ的识别序列相同,所以过程③中要将基因表达载体中的目的基因切开,应选择位于目的基因上的另一个限制酶HindⅢ.过程④表示采用PCR技术体外扩增目的基因的过程,该过程在高温条件下进行,因此需要使用耐高温的DNA聚合酶(Taq酶).
(4)过程④中可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计引物进行扩增.扩增过程中,在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段.
(5)因为基因中相邻的3个碱基决定一个密码子,所以过程⑤中将克隆的启动子与外源基因编码序列连接时,原引物a所在的P片段的碱基对数目应是3的整数倍,目的是保证外源基因编码序列编码正确的氨基酸序列.
故答案为:
(1)乳腺蛋白基因
(2)基因中启动子的碱基序列不能被转录
(3)BamHⅠHindⅢ耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)
(4)引物 三
(5)保证外源基因编码序列编码正确的氨基酸序列

点评:
本题考点: 基因工程的应用.

考点点评: 本题结合流程图,考查基因工程的原理和应用,意在考查考生分析题图提取有效信息的能力;识记能力和理解所学知识要点,把握知识间内在联系的能力;能运用所学知识,解决生物学问题的能力.

1年前

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