(2013•奉贤区二模)回答下列有关遗传信息传递和表达的问题.

(2013•奉贤区二模)回答下列有关遗传信息传递和表达的问题.
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.请回答下列问题:
(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由______连接.
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为______

(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有______种不同DNA片段.为了提高实验成功率,需要通过______技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝,该方法也是检测______多样性最简单的方法.
(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______.在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒的大肠杆菌,一般需要用添加______的培养基进行培养,用影印法接种到只含______的培养基中培养,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞.
(5)假设用BamHⅠ切割DNA获取目的基因,用MboⅠ切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,能否用BamHⅠ?______.为什么?______.
ok1102003 1年前 已收到1个回答 举报

小院子里的小虫虫 幼苗

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解题思路:1、根据图1分析,DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点,第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置;第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置.
2、根据图2分析,若使用MboI会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamHI来切割目的基因和质粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于筛选出含有重组质粒的受体细胞.

(1)DNA单链中相邻两个碱基之间通过“脱氧核糖-磷酸-脱氧核糖”连接.
(2)SmaⅠ识别的序列为GGGCCC,切割会产生平末端;图1中DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点,第一个识别位点在左端534 bp序列向右三个碱基对的位置;第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置,从而两个位点切割后产生的DNA片段的长度分布为534+3,796-3-3,658+3,即得到的DNA片段长度为537、790、661.
(3)基因D的序列中含有两个识别位点,经过SmaI完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段,基因d的序列中含有一个识别位点,经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段.为了提高实验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,是检测遗传多样性最简单的方法.
(4)能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamHI和识别序列为GATC的MboI,若使用MboI会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamH I来切割目的基因和质粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于筛选出含有重组质粒和质粒的大肠杆菌;再用用影印法接种到只含抗生素A的培养基中培养,重组质粒的受体细胞死亡,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞.
(5)用BamHⅠ切割DNA获取目的基因,用MboⅠ切割质粒,然后形成重组质粒,用BamHⅠ不一定将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处含有GATC,不一定出现GGATCC.
故答案为:
(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖
(2)537bp、790bp、661bp
(3)2PCR遗传
(4)BamH I抗生素B 抗生素A
(5)不一定,因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处不一定出现GGATCC

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查基因工程等相关知识,意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等.

1年前

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