当使用限制酶来获取目的基因时是否一定要用同种限制酶切割DNA和质粒来获取目的基因

一般情况下是的,因为只有这样才能有相同的黏性末端,目的基因和运载体才能重组.但也有两种不同的内切酶产生相同的黏性末端如G↓ATTCG 和↓ATTC.
还有一种可能是,因为运载体上的基因表达是由方向的（即启动子和终止子的位置）,而目的基因的两端末端相同,那么就有可能使目的基因反向接在运载体上,这就可以用双酶切解决,即目的基因和运载体都用相同的两种内切酶,这就可以使目的基因与运载体定向连接了,如：
－－↓－－－－－－↓－－（运载体）￣￣↓￣￣￣￣￣￣↓￣￣（目的基因）
酶1 酶2 酶1 酶2
很抱歉,我只能画出这样的图列,希望能看明白.

在高中的课本上是这么说的 是为了获得同种黏性末端 但其实不然 在真正的基因工程中 会采用两种限制酶同时切割DNA和质粒 为了防止一种限制酶切割会造成出现 DNA-DNA 质粒-质粒 DNA-质粒 三种组合 这样还需要进行选择 所以用两种的话 就只会出现DNA-质粒了 如果你是一个学生 你答题还是答一种 若只是感兴趣那就是两种 希望对你有帮助...

你是讲构建新载体？不一定
1 产生相同的黏性末端可以用同尾酶；
2 如果使用限制酶是平末端酶，那只要任选一种平末端酶切质粒就行了