李玲,2009,《植物生理学模块实验指导》中蒽酮法测可溶性糖的蒽酮试剂是怎么配的?

李玲,2009,《植物生理学模块实验指导》中蒽酮法测可溶性糖的蒽酮试剂是怎么配的?
下面是实验步骤（李玲,2009,植物生理学模块实验指导（很好的一本实验指导书））
（一）可溶性糖的提取
称取新鲜果肉0.5-1.0g（或植物叶片或种子于105～110℃烘箱杀青15 min,然后将温度调至70～80℃烘干至恒重,磨碎烘干的叶片或种子）,剪碎研磨至匀浆,倒入三角瓶（50ml）中,加入10mL80％乙醇,置于80℃水浴中不断搅拌40 min,冷却后4000g离心10min,残渣加5mL 80％乙醇重复提取2次,合并上清液.在收集液中加10 mg活性炭,80℃脱色30 min,过滤,80％乙醇定容至25mL,取滤液供测定.
（二）显色及比色
吸取上述乙醇提取液0.2mL加入0.8ml蒸馏水混合,再加入5mL蒽酮试剂,沸水浴中显色10 min,取出冷却.在波长625 nm处测吸光值.从标准曲线上查取可溶性糖的含量.
（三）绘制标准曲线
取标准葡萄糖溶液将其稀释成0～100 μg•mL-1的不同浓度的溶液（0、10、20、40、60、80、100 μg•mL-1）.分别取1 mL,按上述方法进行显色、比色,测定625 nm处的吸光值,
绘制标准曲线.
可溶性糖含量（mg/g）=C*V*n/a*W*1000
式中：C为查到的待测果实中葡萄糖含量（ug/ml）;a为样品提取液体积（ml）；V为提取液定容体积（ml）;n为稀释倍数；W为果实重量（g）